间充质干细胞(mesenchymal stem cells,简称MSC)外泌体生产无血清培养基是同腾新创专为人类间充质干细胞(包括脐带间充质、骨髓间充质、脂肪间充质等干细胞)设计的外泌体生产培养基,适合在MSC外泌体生产收获阶段使用。也可添加一定比例的营养添加物 ,制备成完全培养基后使用,适用于MSC外泌体生产的细胞扩增阶段、收获阶段。
间充质干细胞营养添加物,是一种人血小板裂解物(human Platelet Lysate, hPL),是非异源性、不含动物血清的,主要用做替代传统培养基中的动物血清的替代物。营养添加物含有丰富的生长因子和细胞因子,旨在提供细胞生长和增殖所需的营养成分。
间充质干细胞外泌体生产无血清培养基是一款用于提高干细胞中外泌体产量的培养基,能支持2D、3D细胞培养模式,相比国内同类培养基,外泌体产量可高出50%以上。并能极大的降低批次间差异、降低各类病毒、支原体等污染风险
本套装包含间充质干细胞外泌体生产无血清培养基2L(500mL×4)以及间充质干细胞营养添加物 100mL。
完全培养基制备
1.使用前,请在37℃水浴中解冻间充质干细胞营养添加物。
2.在间充质干细胞外泌体生产无血清培养基中添加5%间充质干细胞营养添加物(即 500ml 培养基中加入25ml营养添加物),配制成完全培养基后使用。
3.配制好的完全培养基请立即使用,或保存于 2 - 8 ℃ 的条件下,并在 2 周内使用完毕。
外泌体生产
1.细胞复苏、种子扩增:细胞复苏后使用原有的完全培养基(推荐使用间充质干细胞无血清基础培养基套装,货号:C04.004.003)进行培养扩增直至外泌体生产阶段前;
2.使用本产品配制成的完全培养基,进行外泌体生产细胞扩增(推荐配套使用CEL-G® Culture Ad60固定床生物反应器)接种、扩增。
3.在MSC外泌体生产收获阶段,即当细胞在完全培养基中生长3-4天后,可以根据工艺需求,自主选择培养基中是否添加营养添加物。
4.若选择使用完全培养基,则可直接收获上清。
5.若选择不添加营养添加物,使用 1X PBS 溶液将细胞进行润洗;
6.然后加入间充质干细胞外泌体生产无血清培养基继续培养一段时间 ,收取细胞培养上清液,该上清液即可用于外泌体提取。
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