案例应用丨同腾新创MSC培养基在间充质干细胞3D培养基中应用（上）

间充质干细胞来源多样、取材方便，易于分离、培养、扩增和纯化，多次传代扩增后仍具有干细胞特性，有望成为组织工程、细胞重编程，以及细胞转分化理想的起始材料，因此间充质干细胞的高效培养是很多实验研究的基础。

同腾新创自主开发了CEL-G^® Culture MSC 培养基系列，目前主要有以下两款产品。一款是CEL-G^® Culture MSC Basal SFM间充质干细胞无血清基础培养基，适用于多种来源的间充质干细胞原代分离培养、以及传代扩增培养；Basal培养基支持MSC稳定传代至15代。另一款是CEL-G^® Culture MSC ExoPro SFM间充质干细胞外泌体生产无血清培养基，适用于间充质干细胞外泌体生产的细胞扩增阶段、以及收获阶段；ExoPro培养基支持MSC 2D、3D细胞培养收获外泌体。本期，我们主要介绍CEL-G^® Culture MSC Basal SFM间充质干细胞无血清基础培养基。

使用CEL-G^® Culture MSC Basal SFM间充质干细胞无血清基础培养基培养hUC-MSCs（人脐带间充质干细胞）的倍增时间为20~30小时左右，可实现稳定传代生长。2D贴壁培养时，在培养至第15代时，镜下观察细胞形态，显示细胞仍能维持较好的成纤维细胞样生长形态。

图2. hUC-MSCs 使用 CEL-G^® Culture MSC Basal SFM 培养后各代次细胞倍增时间

图3. hUC-MSCs 使用 CEL-G^® Culture MSC Basal SFM 培养后P5、P10及P15代细胞生长状态

同时，使用CEL-G^® Culture MSC Basal SFM间充质干细胞无血清基础培养基培养的hUC-MSCs，能稳定维持MSC表面标记物的表达。我们通过测定细胞表面标记物证明了在P15代时hUC-MSCs表面阳性标记物表达大于98%，阴性标记物小于2%，完全符合国际细胞治疗协会/中检院的检定标准。

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图4. hUC-MSCs 使用 CEL-G^® Culture MSC Basal SFM 培养后表面标记物表达情况

CEL-G^® Culture MSC Basal SFM间充质干细胞无血清基础培养基能够维持MSC的无分化生长，连续稳定传代至15代的同时保持细胞的形态特征和正常的染色体核型，保证MSC的高增殖率以及分化潜能，并能极大的降低批次间差异、降低各类病毒、支原体等污染风险，为MSC的培养及干细胞制剂的研发提供了科学的保障。